免疫比浊法是一种基于抗原-抗体特异性结合反应的检测技术,广泛应用于临床检验和生物医学研究领域。透射法作为其核心检测方式,通过测量溶液中免疫复合物形成后对入射光的散射或吸收变化,实现对目标物质的定量分析。该方法具有操作简便、灵敏度高、重复性好等优势,特别适用于血清、血浆等体液中蛋白质、激素、炎症标志物等大分子物质的检测。随着自动化仪器的普及,免疫比浊法检测试剂(盒)在疾病诊断、疗效监测和健康筛查中发挥着越来越重要的作用。
免疫比浊法检测试剂(盒)(透射法)可针对多种生物标志物进行检测,常见项目包括:
1. 免疫球蛋白检测:如IgG、IgA、IgM等,用于评估免疫功能状态及感染性疾病的辅助诊断;
2. 补体系统成分检测:包括C3、C4等补体蛋白,用于自身免疫性疾病和炎症反应的监测;
3. 急性时相反应蛋白:如C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA),反映机体炎症程度;
4. 特定疾病标志物:如类风湿因子(RF)、抗链球菌溶血素O(ASO)等;
5. 代谢相关蛋白:如载脂蛋白A1/B、转铁蛋白等。
透射法免疫比浊检测通常包含以下关键步骤:
1. 样本预处理:采集静脉血后离心获得血清/血浆,避免溶血和脂血干扰;
2. 试剂复溶:根据试剂说明书进行冻干试剂的溶解和混匀;
3. 反应体系建立:按比例混合样本与试剂,孵育形成抗原-抗体复合物;
4. 光学检测:使用分光光度计在特定波长(通常340-650nm)测量透射光强度变化;
5. 结果计算:通过标准曲线法或因数法计算待测物浓度。
为确保检测准确性,需严格执行以下标准:
1. 国际标准化要求:参照CLSI(临床实验室标准协会)EP系列文件建立检测体系;
2. 试剂性能验证:包括灵敏度(≤1mg/dL)、线性范围(R²≥0.990)、批间差(CV≤15%)等;
3. 校准品溯源:采用WHO国际标准物质或经认证的二级标准品进行校准;
4. 室内质控:每日运行高、低两个浓度质控品,结果需落在预设范围内;
5. 干扰物控制:明确溶血(Hb≤5g/L)、脂血(TG≤1500mg/dL)、胆红素(≤20mg/dL)的允许阈值。
通过规范化的检测流程和严格的质量控制,免疫比浊法检测试剂(盒)(透射法)能够为临床提供可靠、准确的检测结果,满足现代医学实验室的精准诊断需求。